Центр лабораторных технологий (ЦЛТ) ГБУ РО «ОДКБ» является крупной лабораторией Областного лечебно-профилактического учреждения третьего уровня, выполняющей высокотехнологичные и уникальные исследования в условиях оказания амбулаторно-поликлинической и многопрофильной лечебно-диагностической помощи.
В соответствии с имеющейся лицензией (регистрационный номер ЛО-61-01-00464755 от 14.09.2015 года) на осуществление медицинской деятельности, в том числе клинической лабораторной диагностики, а также санитарно-эпидемиологическим заключением №61.РЦ.10.000.М.001045.12.16 от 07.12.2016 г., выданным Управлением Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека по Ростовской области, выполняет работы и в области идентификации возбудителей инфекционных заболеваний человека и животных и генно-модифицированных организмов III–IV степеней потенциальной опасности, осуществляемой в замкнутых системах.
Деятельность ЦЛТ регламентируется: нормативными документами и приказами МЗ РФ и МЗ РО, ГОСТами в области клинической лабораторной диагностики, санитарно-эпидемиологическими правилами и нормами, санитарными правилами для лечебно-профилактических учреждений, приказами главного врача ГБУ РО «ОДКБ», документацией СМК (ISO 9001 2015г., сертификат выдан 30.07.2018 г.).
Основными задачами ЦЛТ ГБУ РО «ОДКБ» являются проведение клинических лабораторных исследований для выявления факторов риска и (или) причин заболевания, определения тяжести процесса и прогноза болезни, мониторинга терапии, определения концентрации лекарственных веществ, реализации программ скрининга.
Количество гематологических, цитологических, биохимических, микробиологических, иммунологических, коагулологических, общеклинических, молекулярно-генетических исследований составляет более 800 000 в год.
Исследования представлены нижеописанными методами:
ГЕМАТОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ:
- Общий анализ крови
- Тромбоциты
- Ретикулоциты
- Миелограмма костного мозга
- Цитохимия костного мозга
- LE-клетки
- Время свертываемости крови по Сухареву
- Малярия
ОБЩЕКЛИНИЧЕСКИЕ:
- Общий анализ мочи
- Исследование мочи по Нечипоренко
- Исследование мочи по Зимницкому
- Определение суточной потери белка в моче
- Анализ спинномозговой жидкости
- Общий анализ мокроты (+ ВК)
- Исследование транссудатов и экссудатов
- Исследование синовиальной жидкости
- Общий анализ кала (копрограмма)
- Исследования кала на простейшие и гельминты
- Исследование соскоба на энтеробиоз
- Кал на скрытую кровь
- Исследование отделяемого мочеполовых органов
- Кольпоскопическое исследование влагалищных выделений
- Микроскопическое исследование отделяемого из носа (Риноцитограмма)
- Цитологическое исследование материала, полученного
при диагностическом гинекологическом осмотре (мазок на АК)
- Цитологическое исследование мазка-отпечатка слизистой желудка на H. рylori.
БИОХИМИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ КРОВИ:
- Определение уровня глюкозы
- Определение уровня холестерина
- Определение уровня билирубина и его фракций
- Определение активности аланинаминотрансферазы
- Определение активности аспартатаминотрансферазы
- Определение активности амилазы
- Определение активности щелочной фосфатазы
- Определение активности гамма-глютамилтранспептидазы (ГГТП)
в сыворотке крови
- Определение уровня мочевины
- Определение уровня креатинина
- Определение уровня общего белка
- Определение уровня мочевой кислоты
- Определение уровня хлоридов ликвора
- Определение уровня альбумина
- Определение хлоридов пота
- Определение уровня лактатдегидрогенезы
- Определение уровня фосфора
- Определение уровня кальция
- Определение уровня сывороточного железа
- Определение уровня ферритина
- Определение уровня трасферрина
- Определение уровня цистатина
- Определение СРБ
- Определение ревматоидного фактора
- Определение активности ASO
- Суточная экскреция солей в моче
- Определение уровня С-3 компонента комплимента
- Определение уровня С-4 компонента комплимента
- Определение КЩС крови
- Гемостазиограмма простая и развернутая
- Ацетон в моче
- Определение концентрации вальпроевой кислоты
- Определение уровня сывороточных иммуноглобулинов IgA
- Определение уровня сывороточных иммуноглобулинов IgG
- Определение уровня сывороточных иммуноглобулинов IgM
БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ:
- Исследование крови на стерильность
- Исследование спинномозговой жидкости
- Исследование мокроты, промывные воды бронхов
- Исследование мочи на стерильность
- Исследование отделяемого ран, инфильтратов, транссудатов, экссудатов
- Исследование отделяемого половых органов
- Исследование отделяемого глаз, ушей
- Исследование отделяемого носоглотки
- Исследование отделяемого кишечника
- Дисбактериоз
- Исследование кала на ротовирусы
- Исследования кала на аденовирусы
- Исследование кала на энтеровирусы
- Определение чувствительности микроорганизмов к антибиотикам
ПРОИЗВОДСТВЕННЫЙ КОНТРОЛЬ:
- Смывы на БГКП
- Смывы на золотистый стафилококк
- Исследование воздуха помещений
- Стерильность материала
ИММУНОГЕМАТОЛОГИЧЕСКИЕ:
- Определение группы крови и резус фактора
- Фенотипирование эритроцитов
- Скрининг иммунных антител (непрямая проба Кумбса)
- Прямая проба Кумбса
- Определение специфичности АТ (при положительной прямой
пробе Кумбса)
ОЦЕНКА ИММУННОГО СТАТУСА
Исследование гуморального звена иммунитета
- Определение уровня сывороточных иммуноглобулинов: IgA, IgG, IgM
- Определение циркулирующих иммунных комплексов – ЦИК
Иммунограмма
- Определение уровня сывороточных иммуноглобулинов: IgA, IgG, IgM
- Определение циркулирующих иммунных комплексов - ЦИК
- Определение функциональной активности нейтрофилов с использованием НСТ-теста
- Типирование лимфоцитов периферической крови (CD3/19/45, CD4/8/45, CD3/16+56+/45, CD3/HLA-DR/45), CD64
ТИПИРОВАНИЕ КЛЕТОК КОСТНОГО МОЗГА ПРИ ГЕМОБЛАСТОЗАХ:
- В-линия;
- Т-линия;
- Миелоидная линия;
- Без линейной принадлежности
СЕРОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ (МЕТОД ИФА)
Определение специфических антител к инфекционным антигенам
- HSV IgM, IgG авидность (ВПГ-1,2 типа)
- CMV IgM, IgG авидность (ЦМВ)
- EBV ВЭБ IgM (VCA), IgG (EA), IgG(NA)
- Chlamydophila рneumoniae IgA, IgG
- Мycoplasma pneumoniae IgA, IgG
- Toxoplasma gondii IgM, IgG
- Определение антител класса IgM, IgG к SARS-CoV-2
- Определение антител класса IgG к Varicella zoster
- IgG к антигенам гельминтов: описторхисов, трихинелл,
токсокар, эхинококков
- Giardia Lamblia (лямблии) IgA, IgM,Ig G
- Helicobacter pylori суммарные антитела
- HBsAg(гепатит «В»)
- HCV (гепатит «С»)
- HAV IgM (гепатит А)
- Treponema pallidum (сифилис) суммарные антитела
- Определение антител к ВИЧ-1,2 и антигена р24 ВИЧ-1
- АТ к вирусу кори
- Aspergillus
Определение аллергенспецифическихIgE
- Пищевые аллергены (11 позиций);
- Пыльцевые аллергены (11 позиций);
- Бытовые аллергены (11 позиции)
Гормоны щитовидной железы
- Т3св,
- Т4св.
- ТТГ
- АТ к ТПО
- АТ к ТГ
Половые гормоны:
- ЛГ
- ФСГ;
- Тестостерон
Другие исследования
- IgE общий
- IgG к двухцепочечной (нативной) ДНК
- Прокальцитонин
- ПСА
- Кортизол
- Пролактин
- Трансформирующий фактор роста ( TGF-1β)
АТ класса IgG к Varicella zoster
ИССЛЕДОВАНИЯ МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИМ МЕТОДОМ (ПЦР)
Выявление ДНК инфекционных агентов в крови, моче, соскобах со слизистых различной локализации, костном мозге, ликворе, пр. биологическом материале
- Cytomegalovirus
- Herpes SV 1-2 типа
- Virus GH 6 типа
- Epstein-Bar virus
- VZV (ветряная оспа)
- Candida albicans
- Chlamydophila рneumoniae
- Mycoplasma pneumoniae
- Bordetella multi:
Bordetella pertussis
Bordetella parapertussis
Bordetella bronhchiseptica
- Mycoplasma hominis
- Ureaplasma ur.+Ur. Par
- Chlamydia trachomatis
- Influenza A virus (вирус гриппа А)
- Influenza B virus 9 (вирус гриппа В)
- ОРЗ ВирусКомплекс:
Human respiratory syncytial virus
Human coronavirus OC43
Human parainfluenza virus type 1
Human parainfluenza virus type 2
Human parainfluenza virus type 3
Human parainfluenza virus type 4
Human rhinovirus
Human adenovirus
Human metapneumovirus
Human coronavirus 229E
Human coronavirus NL63
Human coronavirus HKU1
- Parvovirus B19
- Haemophilus influenza
- Streptococcus pneumoniae
- Квант 15 (папилломавирус):
HPV 6,11
HPV 16, 31 33 35 52 58
HPV 18 39 45 59
HPV 51
HPV 68
- Муковисцидоз
ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ
- FISH (метод флуоресцентной гибридизации in situ) бластных
клеток костного мозга на химерные гены (8 позиций)
- Кариотипирование бластных клеток
- Выявление повышенной ломкости хромосом при анемии Фанкони.
На сегодняшний день в ЦЛТ трудятся 15 врачей клинической лабораторной диагностики. Из них - 3 кандидата наук, 8 - с высшей квалификационной категорией, 9 биологов, 17 работников со средним медицинским образованием, из них 12 - с высшей квалификационной категорией.
Материально-техническая база ЦЛТ представлена современным высокотехнологичным оборудованием, которое составляет около 200 единиц. Каждая единица оборудования проходит поверку и техническое обслуживание в соответствии со стандартами. Качество лабораторных исследований оценивается ежедневным внутрилабораторным контролем с применением стандартизированных наборов и построением контрольных карт Шухарта, регистрацией в электронном и печатном виде. Постоянно ЦЛТ ГБУ РО «ОДКБ» участвует в ФСВОК (Федеральный контроль качества лабораторных исследований).
По срокам выполнения клинические лабораторные исследования, с момента доставки биоматериала в лабораторию, с учётом требований стандартов медицинской помощи и клинических рекомендаций (протоколов лечения), по вопросам оказания медицинской помощи подразделяются на:
экстренные – до 30 минут;
плановые – свыше 3 часов.
Выполнение плановых исследований проводится с учетом трехуровневой системы организации медицинской помощи лабораторных исследований. Экстренные исследования осуществляются в ургентном (экспресс) отделе ЦЛТ в круглосуточном режиме.
Нужно отметить, что в условиях распространения коронавирусной инфекции SARS-CoV-2, при перераспределении потоков и организации ковидных госпиталей, увеличился поток больных по экстренной службе в ГБУ РО «ОДКБ». В связи с чем нагрузка на ЦЛТ возросла 1,5-2 раза.
При этом из общего количества исследований, выполненных ЦЛТ за 2020 г., которое составило 814000, прослеживается тенденция к увеличению анализов по биохимическим – 31190 (13,7%), коагулологическим и общеклиническим – 6645 (22,6%), а также иммунологическим параметрам – 6030 (11%), вследствие увеличения больных, госпитализируемых по скорой помощи. В результате количество анализов на одного стационарного больного, по сравнению с предыдущим годом, выросло с 35,1 до 40,6.
По амбулаторным пациентам за 2020 г., напротив, отмечалось снижение количества исследований по биохимическим – 7282 (35%); коагулологическим – 345 (30%), общеклиническим – 11501 (55%); микробиологическим – 1042 (58%), молекулярно-генетическим – 867 (32%) параметрам. Вышеуказанные изменения произошли из-за уменьшения потока пациентов консультативно-диагностического центра ГБУ РО «ОДКБ», находившегося на капитальном ремонте. Но при этом количество анализов на 100 амбулаторных посещений по сравнению с предыдущим годом выросло с 35,1 до 37,1. Количественный анализ исследований, выполненных за 6 месяцев 2021 года в травматологическом, хирургическом, педиатрическом отделениях, идентичен количеству анализов, выполненных за весь период 2020 года.
Таким образом, нужно отметить, что качественное выполнение большого обьема лабораторных исследований стало возможным:
1. благодаря четкому распределению функциональных обязанностей, высокой квалификации и ответственности работников;
2. за счет централизации лабораторной службы, проведенной в ГБУ РО «ОДКБ», позволившей контролировать соблюдение правил преаналитического этапа лабораторных исследований и обоснованность назначений, сократить запросы дублирования выданных результатов исследования, осуществлять контроль при плановой госпитализации пациентов (наличие результатов исследований согласно приказа №2230 от 31.12.2015 г.), усилить контроль за оснащением и исправностью лабораторного оборудования, проведением технического обслуживания, наличием реагентов, проведением контроля качества, ведением отчетной документации;
3. благодаря организации работы ЦЛТ в соответствии с требованиями стандартов мировой системы менеджмента качества ISO 9001:2015;
4. постоянному внедрению новых методов исследования, повышению уровня квалификации работников.
Медицинский персонал ЦЛТ постоянно проходит обучение на Центральной базе МЗ России по программам: «Гематология»; «Современная лабораторная диагностика», ПЦР-анализ в клинико-диагностических лабораториях, «Цитология», «Проточная цитофлуориметрия в онкогематологии» и на базе МП и ГО в сфере здравоохранения, ФГБОУ ВО РостГМУ (г. Ростов-на-Дону), по темам: «Актуальные вопросы клинической лабораторной диагностики и лабораторной генетики, биохимические исследования, изосерология, гематология, лабораторная генетика, общая микробиология, инфекционная иммунология, частная микробиология, санитарная микробиология».
Работники лаборатории принимают участие в научно-практических конференциях и конгрессах с международным участием, вебинарах по усовершенствованию практических и теоретических навыков.
Сотрудничество с отделениями ЛПУ г.Ростова-на-Дону: ОКДЦ, ГБУ РО «ОКБ №1», Областным центром профилактики и борьбы со СПИД и ИЗ РО, кафедрами РостГМУ, ФГБУ «ФНКЦ ДГОИ им. Дмитрия Рогачева», а также с ведущими педиатрическими центрами г.Москвы позволяет быть в курсе актуальных проблем современной лабораторной диагностики. На основе анализа своей работы сотрудники ЦЛТ публикуют статьи, участвуют в научных конференциях.
В настоящее время в ЦЛТ внедряются следующие новейшие методики: «Определение TREC и KREC для скрининга ТКИН и агаммаглобулинемий у новорожденных, оценки трансплантации стволовых клеток костного мозга, оценки химиотерапии у онкологических больных, классификации больных с ОВИН;
- "БакРезиста GLA анализа ДНК бактерий, резистентных к гликопептидным и бета-лактамным антибиотикам, методом ПЦР в режиме реального времени»;
- Определение активности окислительного взрыва моноцитов и гранулоцитов в гепаринизированной цельной крови, на проточном цитофлуориметре;
- Мультиплексный твердофазный иммунофлуоресцентный анализ (с применением биочипов), технология ImmunoCAP ISAC (ImmunoSolid-phase Allergy Chip), на приборе Phadia-250.
Перспективы деятельности ЦЛТ
Основными задачами ЦЛТ в условиях строительства нового хирургического корпуса и трансплантации костного мозга ГБУ РО «ОДКБ» являются:
1. освоить высокотехнологичное оборудование, заявленное в проектной документации, сформированное на основании стандартов оснащения КЛД (выбор оборудования для трансплантации костного мозга и забора гемопоэтических стволовых клеток основан на требованиях и стандартах лечения онкологических и гематологических заболеваний у детей);
2. внедрить порядок медицинского обследования при трансплантации костного мозга и гемопоэтических стволовых клеток в медицинской организации в соответствии с Приказом Министерства здравоохранения Российской Федерации от 12 декабря 2018 г. №875н: «Порядок оказания медицинской помощи при заболеваниях (состояниях), для лечения которых применяется трансплантация (пересадка) костного мозга и гемопоэтических стволовых клеток (п.22-п.23);
3. освоить приборы для секвенирования и станции для выделения геномных ДНК и РНК:
1. Секвенатор Ion GeneStudio S5 Plus, ThermoFisher Scientific, США.
Прибор необходим для определения известных генетических мутаций, ассоциированных с онкогематологическими заболеваниями. Результаты анализа онкогенных мутаций, делеций или инсерций позволяют разделить больных на группы по различным терапевтическим стратегиям. Анализ осуществляется на готовых панелях компании производителя. Отличается высокой производительностью и небольшой стоимостью прогона по сравнению с другими производителями.
2. Система высокопроизводительного секвенирования MiSeq System, SY-410-1003 Illumina.
Секвенирование выполняется методом синтеза (SBS). Данная технология поддерживает массово-параллельное секвенирование, используя метод флуоресцентномеченных нуклеотидов. Наиболее востребована для поиска неизвестных сайтов мутаций при помощи полногеномного секвенирования, для установления и подтверждения диагноза. Также оборудование используется для HLA-типирования, которое выполняется методом NGS секвенирования, способным разрешать аллельные неоднозначности, проводит мониторинг химеризма после трансплантации костного мозга. Автоматическая обработка результатов позволяет минимизировать влияние субъективных факторов. Анализ осуществляется на панелях реагентов для полногеномного анализа и панелях, производимых непосредственно под задачи заказчика.
3. Автоматизированная лабораторная станция Biomek 4000 с интегрированным оборудованием и готовыми рабочими протоколами, Beckman Coulter Inc., США.
Данная станция позволяет в полном объеме проводить пробоподготовку для секвенирования следующего поколения (NGS) онкологических панелей, HLA-типирования, секвенирования транскриптома, отбора целевых участков/экзона и многое другое. В нашем случае роботизированная станция планируется для автоматизации процесса подготовки ДНК библиотек для SBS, NGS анализа (пулирование ампликонов, фрагментация ДНК, очистка фрагментов, пришивка адаптеров, индексирующая ПЦР, приготовление финальной библиотеки для загрузки в секвенатор), секвенированию по Сэнгеру.